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          1. 關于NEPA21的常見問題解答

            (如果下面沒有您所需要的答案,請聯系我們,我們將于24hr內響應)

             

            Questions Answers
            Q1 NEPA21可以用于細菌或酵母的電轉化嗎? A1 不行,NEPA21是專用于動物細胞或植物原生質體轉染的,基于方波波形而設計,電壓控制精確且電刺激溫和,有利于提高轉染效率和細胞存活率。轉化細菌和酵母適宜使用基于指數衰減波波形的電穿孔儀,或其它能產生高壓脈沖的裝置。
            Q2 什么是電穿孔脈沖(poring pulse)? A2 電穿孔脈沖是用于使細胞膜或核膜上產生小孔的脈沖電刺激,DNA或RNA等外源基因可以通過小孔進入到細胞內。這是用電穿孔法進行基因導入的基本原理,大部分品牌的電轉染儀都設計有這個步驟。NEPA21除可以產生電穿孔脈沖外,還具備很多新功能,請參看Q3, Q4 和Q5
            Q3 什么是導入脈沖(transfer pulse)? A3 導入脈沖用于將帶負電的核酸分子通過"電泳效應"導入到細胞中,采用低壓和長脈沖時間的設計,充分利用"小孔修復"的這段時間,大大增加基因的轉染效率。這是NEPA GENE的專利技術。
            Q4 為什么要進行基因的反向導入? A4 在體外轉染(in vitro)尤其是懸浮狀態下轉染時,雙向的基因導入模式,可以大大提高轉染效率;在活體(in vivo)轉染時,雙向導入模式,可以擴大轉染區域。這是NEPA GENE的專利技術。
            Q5 為什么設計多次脈沖? A5 多次脈沖可以提高穿孔效率和導入效率,從而提高轉染率。由于NEPA21的多次脈沖是采用"電壓衰減"的方式進行的,不會給細胞造成額外的損傷。這是NEPA GENE的專利技術,也是NEPA21獲得高轉染效率和高細胞存活率的重要原因之一。L
            Q6 怎樣選擇in vivo, in ovo, ex vivo實驗用的電極? A6 請將你需要做的實驗告訴我們,我們會為您推薦合適的電極和提供相關的文獻(reference)、實驗方案(protocol)供您參考。讓華粵成為您的私人實驗顧問!
            Q7 怎樣選擇合適的電轉杯耗材? A7 一般情況,我們推薦您使用2mm間隔的電轉杯,它適用的細胞數量范圍最廣,也是最多研究者使用的電轉杯型號。針對這個型號的電轉杯,我們可以提供的實驗方案(protocol)共享服務更多、準確性更高。
            Q8 NEPA21與其它品牌的電轉杯兼容嗎?或者,NEPA的電轉杯可以用于其它品牌的電轉染儀嗎? A8 理論上只要大小合適,電轉杯是通用的。但不同廠家使用的模具和材料有差異,因此電轉杯的電阻會有差別。當您使用其他品牌的電轉杯來執行我們為您建議的實驗方案(protocol)時,所取得的效果與使用NEPA GENE電轉杯的效果可能會有差別。同理,當您將NEPA GENE的電轉杯用于其它品牌的儀器時,也需要對電轉染的參數進行優化調整。
            Q9 NEPA21的轉染過程是否別的試劑輔助? A9 不需要,電轉染時只需使用您平時培養細胞用的基礎培養基(不含血清)。目前只有NEPA21能做到這一點。
            Q10 為什么你們不將對應于不同細胞或組織的轉染方案(protocol)在網頁中列出來? A10 不同的細胞類型所適用的轉染程序不一樣,即使是名稱、來源相同的細胞,在不同實驗室的培養環境下,細胞膜對電刺激的反應亦可能不一致。因此,我們不建議死板的將protocol與cell type一一對應。我們會根據您的細胞的具體情況,為您設計一套個性化的轉染方案(protocol)。多次實踐經驗告訴我們,如果僅在網頁上給不同細胞羅列一個"標準程序",您在實際使用中很可能得不到網頁上所顯示的最佳轉染效果。
            黃色A片三級三級三級
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